我們在顯微鏡中看到的物體是透過光源被觀察到的，這就意味著物體中的顏色信息需要通過光源才能被表達(dá)出來。然而，光線本身的強(qiáng)弱也影響著這一過程中物體的色彩信息。下面介紹使用顯微鏡如何將光線調(diào)亮。這一系列過程被稱為“曝光”(continuous light)。
一、使用顯微鏡
使用顯微鏡的基本原理是，當(dāng)觀察物體時，光線通過物鏡上的小孔（鏡筒）反射進(jìn)物鏡中，經(jīng)過散射和折射（如反射鏡）之后落在散射物鏡上的光線將會進(jìn)入物體內(nèi)部。這種方法需要一個特定的“放大鏡”(leap microscopy),這一放大鏡不能再使用普通光學(xué)顯微鏡直接觀察，而是需要借助特殊的光學(xué)設(shè)備來調(diào)節(jié)光線在進(jìn)入物體內(nèi)部之前照射進(jìn)入物鏡之中形成光照波長的變化才能獲得一個正確的效果。這一過程中光照波長由物鏡中發(fā)出的能量與透鏡內(nèi)聚集的光線產(chǎn)生的能量之比來確定，例如一個400納米的光束就能發(fā)出1×1012 lm的光。
二、調(diào)整亮度
為了達(dá)到曝光的目的，需要調(diào)整光線亮度。通常而言，調(diào)色板上的光標(biāo)越亮，就越接近于所需的亮度，此時觀察畫面就越清晰，同時對物體色彩中飽和度較低、飽和度較高的顏色信息進(jìn)行保存。但是，由于光標(biāo)本身會產(chǎn)生光強(qiáng)信號，所以如果調(diào)亮光標(biāo)之后觀看者還是感覺亮度不夠，這就需要使用調(diào)亮增壓器進(jìn)行增亮處理。
三、控制光源亮度
要對光源進(jìn)行調(diào)整，必須先對光源進(jìn)行調(diào)整。因?yàn)樵诠饩€的變化過程中，光強(qiáng)也會發(fā)生變化。如果光源的亮度太高或太低，都會對光源造成不利影響。在對光源進(jìn)行調(diào)整的時候，應(yīng)使用能夠?qū)庠催M(jìn)行亮度調(diào)整的儀器裝置。使用顯微鏡，我們可以將光源置于顯微鏡底座(block station)下、將光路置于顯微鏡底座內(nèi)的水平位置與傾斜角度之中。通過調(diào)節(jié)水平位置也可以對光源進(jìn)行亮度調(diào)節(jié)。
四、調(diào)節(jié)亮度的大小
現(xiàn)在，要調(diào)節(jié)到相同的亮度，需要使用量筒(sigma)來測量。量筒中有一個測光計，能夠精確測量到最大亮度的變化。因此，用量筒測量出物體的亮度水平，就可以在這一水平上獲得物體的亮度調(diào)節(jié)信息：調(diào)節(jié)亮度變化會引起一系列視覺效果變化，比如亮度升高或降低、亮度降低或升高或降低等。
五、調(diào)節(jié)亮度的方法
調(diào)節(jié)亮度需要將照明系統(tǒng)的發(fā)光強(qiáng)度調(diào)節(jié)到一定的范圍，如果光強(qiáng)太大，會造成照明系統(tǒng)所發(fā)出的光的漫反射強(qiáng)度過大，引起亮度不夠或者過度失真；而光線太弱，則會引起照明系統(tǒng)所發(fā)出的光的漫反射強(qiáng)度過小，引起光線過于刺眼。調(diào)節(jié)亮度不是一個簡單的過程，它涉及到顯微鏡系統(tǒng)中的許多控制器件（如電子顯微鏡、發(fā)光二極管等）以及一些測量儀器（如電化學(xué)分析儀、電化學(xué)探針、電泳分析儀等）都參與到控制光強(qiáng)的過程中來。比如，在許多光學(xué)顯微鏡中，當(dāng)電子顯微鏡系統(tǒng)輸出一束光時，會產(chǎn)生由電子元件所發(fā)出的光；而在掃描顯微鏡中的一些顯微鏡系統(tǒng)則會產(chǎn)生一束來自電子元件的光。由于這兩種方法之間有著相互適應(yīng)之處（圖1),所以我們可以在使用顯微鏡時通過調(diào)節(jié)亮度進(jìn)行調(diào)節(jié)自己使用儀器完成的工作流程。
